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微生物发酵法生产胞嘧啶核苷方法的简介 -威尼斯5139手机版

嘧啶核苷包括尿嘧啶核苷和胞嘧啶核苷两类。胞嘧啶核苷又名胞苷(cytidine)、胞啶、1-β-d-呋喃核苷胞嘧啶。嘧啶核苷的医疗用途较广泛,近年来在抗病毒、抗癌症、抗艾滋病药物方面已经显示了不可替代的作用。胞苷作为嘧啶核苷,主要用于生产抗肿瘤、抗病毒药物的中间体,是制造阿糖胞苷(ara—cr)、环胞苷(cyclo c)、三磷酸胞苷(ctp)、胞二磷胆碱(cdp—choline)等药物的主要原料。

随着药物研制的深入,对嘧啶核苷的需求量也随之增大,人们期望得到廉价的、能大规模生产胞苷的工艺方法。于是,胞嘧啶核苷生物合成(发酵法)的研究也日益得到更广泛的重视。


嘧啶核苷的生产方法

嘧啶核苷的生产方法主要有两种。一种是传统的嘧啶核苷生产方法是使用rna经化学方法水解,然后制备2种嘧啶核苷,这需要大量的优质rna原料,而且2种嘌呤核苷及2种嘧啶核苷都必须产销平衡,否则成本很高,且分离过程复杂,收率低,副产物多。发酵法和合成法相结合以尿嘧啶为前体发酵,得到的尿苷再通过化学法转化为胞苷。而用微生物发酵法生产胞苷,具有条件简单、成本低、产率高、周期短、控制容易等优势。


1.1 直接发酵法

直接发酵法是借助于微生物具有合成自身所需核苷的能力,通过对特定微生物的诱变处理,选育出营养缺陷型及核苷类似物抗性突变株,以解除代谢调节中的反馈抑制和反馈阻遏,从而达到在发酵过程中积累嘧啶核苷的目的,具有发酵条件简单、周期短、易控制、产率高和产量大等突出优点。

1.2 添加前体物发酵法

利用核苷酸生物合成途径的补救途径,通过在核苷生产菌的培养基中添加前体物尿嘧啶,使嘧啶碱基通过补救途径直接合成核苷,从而增加尿苷的生成量。由二次诱变的尿嘧啶缺陷型的枯草芽孢杆菌在添加尿嘧啶的培养基中可大量积累胞苷。

1.3 通过基因重组技术构建胞苷生产菌进行发酵生产

经过传统诱变得到的菌株会产生大量次级突变,具有菌体生长速度慢等弱点,是目前工业生产中难以解决的问题。基因工程技术改造菌株,如基因克隆、基因敲除等,因其无次级突变、改造目的性强、实验周期短等优势逐渐受到人们的重视。


近年来,随着胞苷在抗肿瘤、抗病毒药物等方面应用的开拓,促进了国内胞苷产业化和医药行业的发展。利用好微生物遗传育种技术,根据代谢调控育种的原理,争取选育出更高产稳定的胞苷生产菌株。

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